הסר Cys צידי שרשרת tBu Protecting Group Methods
Cys(tBu)בדרך כלל ב-TFA ו-I2 הם יציבים יחסית, ולכן הם משמשים לעתים קרובות לשילוב לייצור פפטידים עם הזוג השלישי של קשרי דיסולפיד ומעלה מבלי להפריע לצמדי קשרי הדיסולפיד הקודמים.
הסר tBu השיטות כוללות בדרך כלל כספית אצטט ושיטת טריכלורומתיל סילאן/דיפניל סולפוקסיד.
להלן מבוא לשלבים של שיטת כספית אצטט:
- יביא tBu של פפטידים מומסים בקרח TFA באמצע (5-10mg/ml)
- הוסף פי 10 שווה ערך לכספית אצטט וערבב במשך 3 שעות.
- סובב בלחץ מופחת כדי לאדות עודפי TFA, ממיסים בתמיסה מימית של חומצה אצטית 10%
- הוסף פי 20 מהמקבילה למרקפטואתנול ותן לו לשבת במשך 5 שעות
- צנטריפוגה להסרת משקעים ולאחר מכן התפלה או טיהור HPLC.